C18色譜柱的活化及維護(hù)方法

在液相色譜實(shí)驗(yàn)中，C18色譜柱是常見的一種反相色譜柱。以下是對(duì)該柱子進(jìn)行活化和維護(hù)的方法：

1. 活化新柱

1. 防脫殼處理：將新柱浸入純甲醇或乙腈溶液中，旋轉(zhuǎn)或以其它方式使其表面完·全接觸至少30分鐘。洗去大部分殘留有機(jī)物之后，用純水或75％甲醇或乙腈沖洗2-3次直到輸出液為無(wú)色無(wú)味水平。

2. 酸堿洗處理：在防脫殼處理完成后，使用0.1-1%的醋酸溶液滴于色譜柱表面并停留約30分鐘，并徹·底用DI水沖洗干凈。然后采用0.1-1%的氨水溶液吸附含氨基的樣品于柱子上并停留約30分鐘，Z后再次用DI水推出至輸出穩(wěn)定后即可。

3. 有機(jī)物處理：加入摩爾比1:1的異丙醇和甲酸制成的混合液進(jìn)柱子中，在流速為0.5 mL/min的條件下梯度洗脫（10% B, 3min; 40% B, 3min; 95% B, 3min，重置至10%過(guò)渡三分鐘），使其開放性自由膠體的更快恢復(fù)。

注意，活化步驟而區(qū)地直到輸出液為無(wú)色無(wú)味水平，這一點(diǎn)比較關(guān)鍵。如果您在某些步驟中出現(xiàn)了問(wèn)題，例如未完·全去除殘留有機(jī)物、洗滌溶劑未嚴(yán)格控制等，可能會(huì)影響到Z終結(jié)果。因此，對(duì)于分析靈敏性和分辨率較高的分析，請(qǐng)盡可能保持每個(gè)步驟的準(zhǔn)確性和一致性。

2. 柱子的維護(hù)

1. 保持潔凈：用高純度水、其他常見的有機(jī)溶劑進(jìn)行沖洗，去除表面殘留樣品、鹽和溶液等物質(zhì)。

2. 防止干燥：建議如果長(zhǎng)期不使用反相色譜柱，注滿一定比例的溶劑并密封。

3. 正確使用：使用時(shí)應(yīng)避免太高或太低的流量，以及過(guò)強(qiáng)的壓力。不使用時(shí)封住兩端，避免雜質(zhì)進(jìn)入。

記得，C18色譜柱的使用壽命大約為100~200次，當(dāng)輸出結(jié)果的峰形變得模糊、輸出穩(wěn)定性下降時(shí)，請(qǐng)及時(shí)更換新柱。